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?手把手教你倒平板、劃平板、涂布操作

發布時間：

2020-02-08

一、無菌準備:
1、提前1個小時打開無菌室紫外燈消毒滅菌
1、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒;
2、將用于微生物培養的器皿、接種的用具和培養基等進行滅菌;
3、所有無菌操作都需在酒精燈旁操作。

二、培養基配置:
1、LB肉湯:肉湯粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸餾水; .
2、營養瓊脂培養基:瓊脂培養基粉300g、5g葡萄糖、1000ml蒸餾水。

三、倒平板操作:
1、將滅菌過的培養皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養基的錐形瓶，左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰;
2、用左手將培養皿打開-條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養基(約10~20ml)倒入培養皿，左手立即蓋上培養皿的皿蓋，輕輕搖勻。

3、等待平板冷卻凝固(大約需5~10min) 后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上。

四、平板劃線操作:

1、將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅;
2、在火焰旁冷卻接種環，并打開盛有菌液的試管的棉塞;
3、將試管口通過火焰;將已冷卻的接種環伸入菌液中，沾取一環菌液;將試管口通過火焰，并塞上棉塞;
4、左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養基。
5、灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三區域內劃線。注意不要將最后一區域的劃線與第一區相連。